微生物常见检测方法总结

微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义。常见的检测方法有：生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测等，本文主要介绍常用的检测方法的的原理，应用范围和优缺点。 微生物生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 1.体积测量法： 又称测菌丝浓度法。 原理：通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。 菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 2.称干重法 原理：利用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity   dry   yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。 3.比浊法 原理：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。 4.菌丝长度测量法 方法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度。 微生物计数法 1.血球计数板法 这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。 2.染色计数法 为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。 3.比例计数法 将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。 4.液体稀释法 对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。 5.平板菌落计数法 这是一种最常用的活菌计数法。但方法比较麻烦，操作者需有熟