1、干热灭菌法
常见的有火焰、烧灼、干烤和红外线灭菌等。
①火焰、烧灼:通常用于实验室无菌操作中金属或其它耐火材料制成的器具的灭菌。
②干烤和红外线:利用干热空气或热辐射进行灭菌。一般135~ 145℃需3~5h, 160~ 170℃需2h以上，170~ 180℃需1h以上，180~ 200℃需0.5~1h。除热原则需250℃ 30min,或200℃ 45min, 180℃ 2h。
空气传热慢，穿透力不强，故干热灭菌时间长。
干热灭菌时烤箱内装入物品应留有空隙，以利空气流动，否则使箱内温度不均，部分物品灭菌不彻底。
2、湿热灭菌法
通过热蒸汽或沸水使蛋白质变性而杀灭微生物的方法。湿热穿透力强，灭菌效果较干热好。
①煮沸或流通蒸汽灭菌:
常压下沸水和蒸汽的温度是100℃，般处理30~60min可杀死细菌繁殖体，但不能完全杀灭芽孢。此法适用于不能高压蒸汽灭菌的物品。
②低温间隙灭菌(巴斯德灭菌法)：
将物品先用60~ 80℃加热(或煮沸) 1h, 然后置20~25℃保存24h(或常温过夜)，使其中残存的芽孢萌发成繁殖体，再用以上条件灭菌，如此反复三次。本法适用于不耐高温或高温下易变质的物品，但很费时。
③高压蒸汽灭菌(热压灭菌法) :
超过一个大气压时，水的沸点高于100℃，反之亦然。
高压蒸汽灭菌就是通过加压提高蒸汽温度，灭菌效果最好。它简便、经济、可靠、无毒，是最可靠、应用最广泛的灭菌法。此法适用于耐高温和潮湿的物品。常用条件为:
115.5℃
30min
121.5℃
20min
126.5℃
15min
注意事项:
a.必须完全排出灭菌器内的空气。否则会影响灭菌器内温度达到规定的要求。
b.注意被灭菌物品的温度。灭菌器内温度与被灭菌物品的温度般是一致的，但在蒸汽输入过快时，后者可能低于前者，所以升温时要有一定的预热时间。另外，降温过快易引起玻璃炸裂。因此，对于一种灭菌产品，应制定固定的灭菌曲线(象冻干曲线样)。
c.定期检查灭菌器内温度的准确性。
3、化学灭菌法
利用化学试剂形成的气体来杀灭微生物的方法。常用的灭菌剂为环氧乙烷(又称氧化乙烯)。
4、滤过除菌法
利用细菌不能通过致密具孔滤材的原理，除去对热不稳定的药品溶液或液体物质中的细菌的方法。过滤法般只能除菌，不能除去支原体和病毒。
过滤除菌的效果与滤膜的性能、孔径的大小、密度、滤膜的厚度等因素有关。
滤过除菌法要求最终过滤的滤膜孔径为0.22pm。由于各厂家生产的相同规格的滤膜质量并不一致，为了保证除菌效果，在使用前后应检查滤器的完好性(如压力维持试验或起泡点试验)。一个过滤器的使用时间应根据品种验证后确定，一般
食品微生物、无菌的常用灭菌法